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双氢睾酮偶联牛血清白蛋白的作用与应用!


一、背景


双氢睾酮偶联牛血清白蛋白是睾酮与载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)经化学交联获得的偶联物。本品溶于PBS(pH7.4)中,蛋白浓度≥1mg/ml,可作为抗原免疫动物用于抗体的制备,或包被于固相载体用于睾酮及其抗体的检测。


睾酮(Testosterone)又称睾丸酮,为天然雄性激素,能促进男性性器官的形成及性征的发育、成熟;对抗雌激素,抑制子宫内膜生长及卵巢、垂体功能;促进蛋白质合成(蛋白同化作用)及骨质形成;刺激骨髓造血功能,使红细胞和血红蛋白增加;还能促进免疫球蛋白合成及增加肾小管对水钠的再吸收。


双氢睾酮可由睾丸直接产生,也可以由周围组织将雄激素和雌激素作为前体物质转化而来。可促进外生殖器和前列腺的正常发育,对于第二性征的出现和维持有积极作用,促进精子在副睾中的成熟。临床上主要用于5α-还原酶缺陷所致性分化异常,鉴别诊断良性前列腺疾病。对前列腺肿瘤的疗效观察、性功能异常、不孕症、女性多毛症等病因的探讨也有非常重要的意义。


睾酮可直接或先转变为活性更强的双氢睾酮,与生精细胞的雄激素受体结合,促进精子的生成.所以,双氢睾酮的作用主要是有:


1、维持生精作用;


2、刺激生殖器官的发育,促进男性副性征得出现并维持其正常形态;


3、维持正常的性欲;


4、促进蛋白质的合成,特别是肌肉和生殖器官的蛋白质的合成,同时还能促进骨骼生长与钙磷的沉积和红细胞的生成。


二、应用


用于G蛋白偶联受体介导雄激素对前列腺癌细胞快速作用的非基因组机制研究:


体外研究G蛋白偶联受体介导的雄激素(双氢睾酮,DHT)对人前列腺癌PC3细胞内Ca2+水平及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性产生的快速非基因组效应,并探讨其机制。


方法:应用钙荧光指示剂Fura-2/AM检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i);Western blot方法检测MAPK家族成员(ERK1/2、JNK和p38)的活化水平;MTT assay检测DHT快速作用对细胞增殖的影响。


结果:DHT可以在一定范围内浓度依赖性地诱导PC3细胞[Ca2+]i快速升高,而且也能快速诱导ERK1/2、JNK的磷酸化,但是对p38的磷酸化却表现为快速的抑制作用;


当细胞外无Ca2+或使用L-型钙离子通道阻断剂预处理细胞,DHT不能诱导这种快速效应;


AR拮抗剂醋酸环丙氯地孕酮预处理细胞,对该快速效应无影响;用蛋白合成抑制剂放线菌酮预处理细胞,DHT仍能诱导[Ca2+]i快速升高;


用睾酮-牛血清白蛋白复合物(短期内不能穿过细胞膜)刺激细胞,仍能诱导[Ca2+]i快速升高;


G蛋白抑制剂百日咳毒素或GDPβs预处理细胞,能明显阻断DHT诱导的快速效应;DHT短暂的脉冲式刺激对PC3细胞的增殖具有一定的促进作用。


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